La determinazione non invasiva del genotipo del Rh fetale
Cos’è il Fattore Rhesus (Rh)
I globuli rossi umani
presentano sulla loro superficie gli antigeni responsabili dei gruppi sanguigni
AB0 e gli antigeni che costituiscono il Fattore Rhesus (Rh). Tra gli antigeni
del fattore Rh, il D è il più importante dal punto di vista clinico. Si
definiscono Rh positivi i soggetti che presentano l'antigene D sulla superficie
dei globuli rossi, sono Rh negativi i soggetti che non lo presentano (circa il
15% della popolazione caucasica).
L’RhD svolge un ruolo fondamentale in quella che viene chiamata
incompatibilità materno-fetale. Se il feto è Rh(D) positivo(Rh+) e la gestante
Rh(D) negativa (Rh-) è probabile che i globuli rossi del feto con l’antigene Rh
entrino nel circolo sanguigno materno. In assenza di opportune precauzioni
durante la gravidanza, c’è il rischio che la gestante sviluppi una reazione
immunitaria producendo anticorpi contro i globuli rossi del feto
(sensibilizzazione o alloimmunizzazione), che rimarranno presenti nel suo
sangue.
In caso di una seconda gravidanza con un feto Rh(D) positivo,
gli anticorpi materni diretti contro gli antigeni eritrocitari del feto possono
passare attraverso la placenta ed aggredire i globuli rossi fetali, che verranno
poi distrutti in quanto riconosciuti come “estranei”. Si determina quindi la
cosiddetta malattia emolitica del feto e del neonato (HDFN).
L’incompatibilità materno-fetale non si presenta quando entrambi i genitori sono
Rh negativi, oppure se la madre è Rh positiva e il padre Rh negativo.
Come evitare il rischio di sensibilizzazione
Per prevenire la
sensibilizzazione, è possibile sottoporsi ad immunoprofilassi con
immunoglobuline anti-D, durante la gravidanza e dopo il parto.
L’utilizzo
dell’immunoprofilassi anti – D non è di per se privo di rischi, in quanto le
immunoglobuline anti-D sono emoderivati di origine umana ottenuti da donazioni
di sangue. Nonostante il rischio di trasmissione di infezioni virali sia molto
basso, ciò tuttavia non può essere completamente escluso.
Cos’è RhSafe®?
RhSafe® è un esame prenatale NON INVASIVO che,
analizzando il DNA fetale isolato da un campione di sangue della gestante,
consente di determinare il Fattore Rh fetale
I vantaggi del test RhSafe®
Il test per la determinazione
precoce non invasiva del fattore Rh (D) fetale, mediante l’analisi del DNA
fetale libero nel sangue materno, è un esame affidabile e utile, divenuto ormai
una routine della gestione delle gravidanze caratterizzate dall’incompatibilità
materno-fetale.
Il test consente di identificare le gravidanze a rischio
per la malattia emolitica del feto e del neonato, e quindi di ridurre il ricorso
alla profilassi anti-D nei casi in cui il feto risulti Rh(D) negativo come la
madre. In questi casi, infatti, non vi è alcun rischio di sensibilizzazione,
pertanto la somministrazione di immunoglobuline anti-D può essere evitata.
Chi può sottoporsi al test RhSafe®?
Tutte le donne in gravidanza Rh (D)
negative con un’età gestazionale di almeno 10 settimane.
Come si effettua il test RhSafe®?
Durante la gravidanza, in conseguenza al ricambio
fisiologico delle cellule della placenta, alcuni frammenti del DNA del feto
circolano nel sangue materno.
Il DNA fetale libero viene inizialmente
isolato dalla componente plasmatica del sangue materno. Successivamente,
attraverso un processo tecnologico avanzato ad elevata sensibilità, il DNA viene
amplificato mediante tecnica Real Time PCR degli esoni 5 e 7 del gene RHD.
L’analisi genetica automatizzata consente di identificare la presenza/assenza di
sequenze di DNA appartenenti al gene RHD e permette, quindi, di definire se il
feto è Rh(D) positivo (presenza del gene RHD) o negativo (assenza del gene RHD)
in donne Rh (D) negative.
Limiti della metodica
Alcuni frammenti del
gene RhD possono essere riscontrati in pazienti con fenotipo Rh-, questo può
verificarsi per via di uno pseudogene (RhDΨ), o di una variante d(C)ce
haplotype, entrambi presenti soprattutto nella popolazione africana. Questi
genotipi possono dare dei falsi positivi tramite l’analisi genetica del RHD. A
causa della presenza di varianti localizzate nei siti di annealing dei primers,
sono possibili anche falsi negativi, specialmente nelle popolazioni meno
studiate.
La sensibilità dell’esame RhSafe® è del 99,7%, mentre la
specificità è del 99,5%.
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